简介:
本发明公开了一种检测细胞内与p53转录激活域相互作用蛋白的方法,其是将待测样品与含有p53‑His重组蛋白的细胞裂解液、包被有p53单克隆抗体的发光微球、生物素化的His标签抗体和链霉亲和素包被的感光微球混合反应后,使用光激化学发光分析仪测量反应孔的光信号值,根据光信号值即可检测样品中是否存在与p53转录激活域相互作用的蛋白。本发明以光激化学发光免疫检测技术为基础,通过构建真核表达载体并在细胞中表达以获得含有p53‑His重组蛋白的细胞裂解液,能使包被有p53单克隆抗体的发光微球与结合了生物素化His标签抗体的感光微球之间的距离小于200nm。本发明方法可用于筛选检测与p53转录激活域相互作用的蛋白,具有操作简单、信噪比高,便于高通量筛选的优点。
本发明公开了一种检测细胞内与p53转录激活域相互作用蛋白的方法,其是将待测样品与含有p53‑His重组蛋白的细胞裂解液、包被有p53单克隆抗体的发光微球、生物素化的His标签抗体和链霉亲和素包被的感光微球混合反应后,使用光激化学发光分析仪测量反应孔的光信号值,根据光信号值即可检测样品中是否存在与p53转录激活域相互作用的蛋白。本发明以光激化学发光免疫检测技术为基础,通过构建真核表达载体并在细胞中表达以获得含有p53‑His重组蛋白的细胞裂解液,能使包被有p53单克隆抗体的发光微球与结合了生物素化His标签抗体的感光微球之间的距离小于200nm。本发明方法可用于筛选检测与p53转录激活域相互作用的蛋白,具有操作简单、信噪比高,便于高通量筛选的优点。