识别检测DNA中5-羟甲基胞嘧啶和5-甲酰胞嘧啶的方法
识别检测DNA中5-羟甲基胞嘧啶和5-甲酰胞嘧啶的方法
来源:北方有色网
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简介:
本发明公开了一种识别检测DNA中5‑羟甲基胞嘧啶和5‑甲酰胞嘧啶的方法,属于分子生物学、核酸化学和表观遗传学领域。本发明方法包括如下步骤:将待检DNA加到含高钌酸钾和碱的混合溶液中,冰水浴条件下反应使DNA中的5hmC氧化为5fC;反应后的NDA纯化后加入到热碱溶液中保温反应使DNA裂解,凝胶分析测得DNA中5hmC和5fC的总数目和位点;待检DNA不经高钌酸钾氧化直接加入到热碱溶液中保温反应使DNA裂解,凝胶分析测得DNA中5fC的数目和位点;对比两次结果得到DNA中5hmC和5fC各自的数目和位点。本发明方法克服了现有检测方法设备需求高、操作繁琐等不足,灵敏度高、适应范围广。
本发明公开了一种识别检测DNA中5‑羟甲基胞嘧啶和5‑甲酰胞嘧啶的方法,属于分子生物学、核酸化学和表观遗传学领域。本发明方法包括如下步骤:将待检DNA加到含高钌酸钾和碱的混合溶液中,冰水浴条件下反应使DNA中的5hmC氧化为5fC;反应后的NDA纯化后加入到热碱溶液中保温反应使DNA裂解,凝胶分析测得DNA中5hmC和5fC的总数目和位点;待检DNA不经高钌酸钾氧化直接加入到热碱溶液中保温反应使DNA裂解,凝胶分析测得DNA中5fC的数目和位点;对比两次结果得到DNA中5hmC和5fC各自的数目和位点。本发明方法克服了现有检测方法设备需求高、操作繁琐等不足,灵敏度高、适应范围广。
标签:化学分析
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