多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的检测方法
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多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的检测方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明属于分析化学技术领域,涉及一种多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的检测方法及其应用。本发明主要是利用经典巯基自组装的方式将能够与PARP特异结合的单链DNA(c-kit-1)修饰于金电极表面,经处理使c-kit-1形成四聚体构型;与PARP孵育后,加入该酶特定的催化底物尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD),即可促使PARP自催化产生一条带有高负电荷的聚腺苷二磷酸核糖(PAR);利用PAR的负电荷吸附带正电荷的电信号分子六氨合钌(RuHex),通过电分析方法对电极表面吸附的RuHex进行定量,通过电化学信号与PARP浓度的关系,绘制标准曲线,通过测量待测样品的电化学信号,通过计算即可实现PARP的灵敏检测。该方法具有好的重复性,高的灵敏度,可应用于PARP及其抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)的检测。
本发明属于分析化学技术领域,涉及一种多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的检测方法及其应用。本发明主要是利用经典巯基自组装的方式将能够与PARP特异结合的单链DNA(c-kit-1)修饰于金电极表面,经处理使c-kit-1形成四聚体构型;与PARP孵育后,加入该酶特定的催化底物尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD),即可促使PARP自催化产生一条带有高负电荷的聚腺苷二磷酸核糖(PAR);利用PAR的负电荷吸附带正电荷的电信号分子六氨合钌(RuHex),通过电分析方法对电极表面吸附的RuHex进行定量,通过电化学信号与PARP浓度的关系,绘制标准曲线,通过测量待测样品的电化学信号,通过计算即可实现PARP的灵敏检测。该方法具有好的重复性,高的灵敏度,可应用于PARP及其抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)的检测。
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标签:化学分析
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