简介： 本发明公开了一种比色型细菌检测膜和制备方法及其细菌检测的方法，属于生物化学技术领域。该细菌检测膜包括基材层及设置在基材层上的检测层，基材层由纳米纤维膜组成，检测层为阳离子聚合物和功能性生物酶组成，阳离子聚合物和功能性生物酶通过层层自组装的方式均匀交替组装设置在纳米纤维膜表面，功能性生物酶的上层和下层均为阳离子聚合物，阳离子聚合物为聚乙烯亚胺，功能性生物酶为β‑半乳糖苷酶。本发明的细菌检测膜可在5分钟内快速对细菌浓度范围进行界定，检测方法简单，在环境、食品和临床医学领域都具备较好的应用。