简介： 本发明公开了一种化学诱变酿酒酵母基因工程菌提高重组质粒稳定性的方法，包括如下步骤：1）化学诱变；2）筛选；3）PCR检测质粒稳定性；4）诱导表达与活性检测。本发明通过化学诱变剂硫酸二乙酯诱变酿酒酵母基因工程菌株，用含有五氟尿嘧啶的培养基筛选，致死淘汰能利用培养基中尿嘧啶的细胞，得到不能利用培养基中尿嘧啶的突变体。该突变体只能或基本只能使用质粒本身基因合成尿嘧啶，因而在非选择培养基中仍然维持质粒稳定性，极大降低了培养基成本，克服了制约利用酿酒酵母基因工程菌大规模生产抗菌肽的关键难题之一。