简介： 本发明属于生物传感器技术领域，涉及一种基于DNA walker的电化学生物传感器的制备方法及其应用；首先将DNA walker‑AFB1适配体与发夹DNA1、发夹DNA2混合，滴加到金电极表面，反应后再滴加MCH，经常温孵育得到电化学生物传感器；然后，在其表面修饰AFB1，锚定探针1、短链DNA1和短链DNA 2的混合液，浸入亚甲基蓝溶液，通过测定传感器电流值，与AFB1浓度构建得到标准曲线；最后通过测定未知样品的电流值，代入构建的标准曲线，即可实现未知样品中AFB1的检测；本发明以极少量的目标物AFB1可以进行双重信号放大，得到更大的亚甲基蓝电化学信号，检测选择性好、速度快、灵敏度高。