简介： 本发明涉及一种电化学发光夹心生物传感器及其制备与应用，包括以下步骤：先采用恒电位法制备金纳米?石墨烯修饰的玻碳电极；再制备Ru(bpy)32+标记的信标Ru?TBA2?AuNPs；将金纳米?石墨烯修饰的玻碳电极浸入含有巯基修饰的TBA1溶液中培育2～8?h，然后在含有凝血酶溶液中培育20?min；最后在Ru?TBA2?AuNPs中培育20?min。本发明的电化学发光夹心生物传感器主要应用于凝血酶的检测。本发明的传感器具有良好的稳定性、重现性、对凝血酶具有很强的特异性，不易受到检测样品中其他物质的干扰；灵敏度高、检测快速、操作简便等特点。对凝血类药物的研发有一定的帮助。