简介： 本发明提供了一种组合物，其包含带负电荷基团、寡核苷酸序列和至少无或一个耐核酸酶键基团以形成化学增强型引物。所述化学增强型引物可用于测序和片段分析。也提供了用于合成所述引物的方法、以及制备测序用DNA的方法和对DNA测序的方法以及含有所述化学增强型引物的试剂盒。对DNA测序的方法可包括在过量扩增引物被所述核酸酶降解而所述化学增强型引物基本上不被降解的条件下，使扩增反应产物与所述组合物接触。