简介： 本发明属于生化分析检测技术领域，具体为溶酶体内酸性水解酶活性的检测方法和检测试剂盒。本发明首先设计包含5种溶酶体内粘多糖酸性水解酶的检测系统，这五种酶分别为：α‑L‑艾杜糖苷酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶、β‑N‑乙酰半乳糖胺‑6‑硫酸酯酶、β‑半乳糖苷酶和芳基硫酸酯酶B酶。本发明利用4甲基伞形酮具有荧光的特性，使用化学合成获得的4甲基伞形酮基团与酶底物结合产生的新底物，采用含有新底物的酸性缓冲溶液与粘多糖水解酶进行反应，水解酶水解底物后释放出游离的4甲基伞形酮荧光物质。样本中水解酶的活性越高，水解底物释放的4甲基伞形酮的量越多，通过荧光检测产生的荧光强度也越高，从而实现对水解酶活性的定量检测。本发明检测灵敏度高、选择性好、抗干扰能力强、可重现性好、操作简便。