简介： 本发明公开了一种完全免固定高效检测miRNA的分析策略。本方法首先在微流控纸芯片原位生长金纳米，随后通过羰基和金的相互作用将葫芦[7]脲固定在纸工作电极上。由于带负电荷的磷酸二酯主链与葫芦[7]脲的负羰基之间的排斥作用，亚甲基蓝标记的探针几乎不能与葫芦[7]脲形成配合物，因此不能有效地产生电化学响应。当目标物和外切酶加入到溶液后，亚甲基蓝标记的探针被外切酶剪切释放亚甲基蓝标记的单核苷酸。由于葫芦[7]脲的超分子识别能力和单核苷酸具有超低的负电荷，亚甲基蓝标记的单核苷酸被葫芦[7]脲捕获产生可检测的电信号实现对目标物的量化检测。本方法不具有复杂的材料生长和生物标记过程，省时省力，操作简单，检测快速，为其他疾病相关生物标记物的小型化检测提供一个途径。