简介： 本发明公开了一种基于原位还原的银纳米簇富集在含有胞嘧啶(C)的环型DNA序列作为信号探针以及采用双重放大策略的电化学发光生物传感器检测目标凝血酶。本发明技术方案是设计识别发夹DNA且具有催化作用的DNA剪切酶，当有目标凝血酶时，打开发夹DNA，在Zn2+作用下对底物DNA进行剪切。再通过杂交链式反应(HCR)聚合大量的含有胞嘧啶(C)的DNA序列，通过NaBH4在电极表面原位还原AgNO3，形成大量的银纳米簇，构建具有双重放大作用的电化学发光生物传感器。将传感器进行发光检测，发光信号与待测样品的浓度成线性关系。本发明将Ag纳米簇信号探针与DNA双重放大技术相结合，快速、高灵敏检测凝血酶，在早期临床分析检测中具有巨大的应用潜力。