基于硫化改性的CoOx的碱性磷酸酶活性比色检测法
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基于硫化改性的CoOx的碱性磷酸酶活性比色检测法
来源:北方有色网
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简介: 本发明属于模拟酶、分析化学技术领域,涉及一种基于硫化改性的CoOx的碱性磷酸酶活性比色检测法,包括:分别于5 mL离心管中加入不同活度的碱性磷酸酶和1 mM HMPi,反应30~60 min;再向混合液中依次加入硫化改性的CoOx悬浮液、TMB、H2O2和醋酸盐缓冲液,混匀体系后反应1~30 min;过膜后用紫外‑可见吸收分光光度计记录波长为652 nm处的吸光度;将上述TMBox的吸光度测量值与对应的ALP活度绘制校准后的ALP活度‑吸光度标准工作曲线;将待测ALP样品重复上述步骤,与标准工作曲线比对,即可获得ALP活性。本发明检测过程条件温和,不需要其他试剂,实现了ALP活度的方便、快速检测,检测成本低廉,操作简单,可检测范围宽至0.8~320 U/L,实现对人体血清中碱性磷酸酶活度的检测。
本发明属于模拟酶、分析化学技术领域,涉及一种基于硫化改性的CoOx的碱性磷酸酶活性比色检测法,包括:分别于5 mL离心管中加入不同活度的碱性磷酸酶和1 mM HMPi,反应30~60 min;再向混合液中依次加入硫化改性的CoOx悬浮液、TMB、H2O2和醋酸盐缓冲液,混匀体系后反应1~30 min;过膜后用紫外‑可见吸收分光光度计记录波长为652 nm处的吸光度;将上述TMBox的吸光度测量值与对应的ALP活度绘制校准后的ALP活度‑吸光度标准工作曲线;将待测ALP样品重复上述步骤,与标准工作曲线比对,即可获得ALP活性。本发明检测过程条件温和,不需要其他试剂,实现了ALP活度的方便、快速检测,检测成本低廉,操作简单,可检测范围宽至0.8~320 U/L,实现对人体血清中碱性磷酸酶活度的检测。
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标签:化学分析
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