用于研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的分析方法
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用于研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的分析方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明涉及用于研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的分析方法。使用两侧具有反应活性基团且具有可断裂基团的交联剂将细胞内蛋白质复合体进行交联并酶解,取一部分酶解产物进行衍生化反应后进入质谱分析;另一部分酶解产物使用化学法断裂交联剂后,使用富集材料将肽段进行富集,将富集出的肽段洗脱后进入质谱分析,根据搜库结果可确定发生交联的肽段,从而建立肽段库。通过交联肽段质谱谱图中确定的发生交联肽段的N端氨基酸信息可在肽段库中找到候选肽段,结合交联肽段质谱谱图m/z和肽段特征离子可确定交联肽段序列,从而获取蛋白质结构及蛋白质相互作用信息。该方法具有操作简便等优点并应用于蛋白质的结构分析及蛋白质复合体相互作用的分析。
本发明涉及用于研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的分析方法。使用两侧具有反应活性基团且具有可断裂基团的交联剂将细胞内蛋白质复合体进行交联并酶解,取一部分酶解产物进行衍生化反应后进入质谱分析;另一部分酶解产物使用化学法断裂交联剂后,使用富集材料将肽段进行富集,将富集出的肽段洗脱后进入质谱分析,根据搜库结果可确定发生交联的肽段,从而建立肽段库。通过交联肽段质谱谱图中确定的发生交联肽段的N端氨基酸信息可在肽段库中找到候选肽段,结合交联肽段质谱谱图m/z和肽段特征离子可确定交联肽段序列,从而获取蛋白质结构及蛋白质相互作用信息。该方法具有操作简便等优点并应用于蛋白质的结构分析及蛋白质复合体相互作用的分析。
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标签:化学分析
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