简介： 本发明公开了一种深度序列质谱分析方法，包括以下步骤：(1)细胞培养；(2)为DEEP SEQ分析准备样品；(3)DEEP SEQ多维分离。本发明直接基于去垢剂的蛋白质溶解、单酶胰酶酶切和扩增，肽段通过多重物理化学正交阶段：高PH反相和强阴离子交换串联耦合，并直接借助于装准的纳升级流速体系，在细孔、延伸长度(25μm×100cm)的低PH RP分析柱上运行，以实现全自动化实时分离。后者的色谱分析阶段在第三个正交维度下获得高峰容，并增加了电离喷雾离子化效率，从而提高检测水平。