简介： 本发明提供一种电化学发光免疫测定方法，具体步骤包括：将样本、生物素化合皮质醇特异性抗体和吡啶钌标记的皮质醇衍生物充分反应，然后加入包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，得到抗原抗体磁性微粒复合体；将所述抗原抗体磁性微粒复合体吸入到测量池中并加入三丙胺，加电压发生ECL反应，使所述抗原抗体磁性微粒复合体化学发光，然后通过光电倍增器测量发光强度从而得出皮质醇的浓度。该方法方便迅速，实现了精确的全自动化。本发明还提供一种试剂盒，该试剂盒可实现标记物的再循环利用，发光时间长、强度高、易于测定，从而提高了检测灵敏度和线性范围，减少了高值标本稀释误差。