CRISPR/Cas13a结合电化学发光系统检测microRNA的方法与应用
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CRISPR/Cas13a结合电化学发光系统检测microRNA的方法与应用
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开了一种CRISPR/Cas13a结合电化学发光系统检测microRNA的方法与应用。该方法包括如下步骤:利用Cas13a/crRNA复合体识别Target RNA,触发Cas13a非特异性剪切RNA探针的活性,从而剪切pre‑trigger;然后将得到的产物通过T4PNK酶去磷酸化处理后得到mature‑trigger,随后进行EXPAR反应,得到dsDNA产物;再将EXPAR扩增产物与含有“光开关”分子和TPrA的溶液进行混合后进行pBPE‑ECL检测,根据获得的有效信号值,即可实现miRNAs检测的目的。
本发明公开了一种CRISPR/Cas13a结合电化学发光系统检测microRNA的方法与应用。该方法包括如下步骤:利用Cas13a/crRNA复合体识别Target RNA,触发Cas13a非特异性剪切RNA探针的活性,从而剪切pre‑trigger;然后将得到的产物通过T4PNK酶去磷酸化处理后得到mature‑trigger,随后进行EXPAR反应,得到dsDNA产物;再将EXPAR扩增产物与含有“光开关”分子和TPrA的溶液进行混合后进行pBPE‑ECL检测,根据获得的有效信号值,即可实现miRNAs检测的目的。
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标签:化学分析
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