连接酶结合核酸外切酶“零背景”检测CYP2C19*2基因型的电化学方法
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连接酶结合核酸外切酶“零背景”检测CYP2C19*2基因型的电化学方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开一种连接酶结合核酸外切酶“零背景”检测CYP2C19*2基因型的电化学方法。特点是选用生物样品检测中稳定性较强的电活性指示剂亚甲蓝(MB)修饰信号探针,作为电信号来源,结合两种酶促反应特异性扩增、剪切的特性,仅当CYP2C19*2存在时,MB修饰长ssDNA才会被指数扩增出来,随后,此ssDNA通过“倒立型”结构形式被具有筛选ssDNA特性的高密度DNA自组装单分子层捕获杂交,MB靠近金电极表面,发生电子传递,最后,使用方波伏安法(SWV)搜集电信号。在人全血临床样品检测中,本发明可区分CYP2C19*2的三种基因型,且实现了“零背景”空白检测。此外,本发明对如何降低检测背景信号具有较为重要的设计参考价值,同时可为个体化药物基因型检测方法提供新思路、新方向。
本发明公开一种连接酶结合核酸外切酶“零背景”检测CYP2C19*2基因型的电化学方法。特点是选用生物样品检测中稳定性较强的电活性指示剂亚甲蓝(MB)修饰信号探针,作为电信号来源,结合两种酶促反应特异性扩增、剪切的特性,仅当CYP2C19*2存在时,MB修饰长ssDNA才会被指数扩增出来,随后,此ssDNA通过“倒立型”结构形式被具有筛选ssDNA特性的高密度DNA自组装单分子层捕获杂交,MB靠近金电极表面,发生电子传递,最后,使用方波伏安法(SWV)搜集电信号。在人全血临床样品检测中,本发明可区分CYP2C19*2的三种基因型,且实现了“零背景”空白检测。此外,本发明对如何降低检测背景信号具有较为重要的设计参考价值,同时可为个体化药物基因型检测方法提供新思路、新方向。
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标签:化学分析
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