超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
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超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开一种超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,包括如下步骤:(1)根据MecA基因的保守系列设计特异性的两条双链短探针(S‑dsDNA)。(2)在LCR反应体系中,以MecA基因为模板,通过DNA连接酶将两条短系列的探针连接形成长的双链DNA(L‑dsDNA)。接着以L‑dsDNA模板,进行循环扩增形成大量L‑dsDNA。(3)将形成的带有巯基及生物素修饰的L‑dsDNA通过金‑硫键固定于BSA修饰的金电极上,通过滴加亲和素‑PolyHRP与L‑dsDNA上的生物素结合,最后将电极置于含TMB和H2O2的底液中,在HRP的催化下,H2O2能氧化TMB产生电化学信号。本方法具有经济、快速、高灵敏度及特异性等优点,可用于单碱基突变系列的检测,并且实现了对关节假体周围感染病人关节液中MRSA的检测。
本发明公开一种超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,包括如下步骤:(1)根据MecA基因的保守系列设计特异性的两条双链短探针(S‑dsDNA)。(2)在LCR反应体系中,以MecA基因为模板,通过DNA连接酶将两条短系列的探针连接形成长的双链DNA(L‑dsDNA)。接着以L‑dsDNA模板,进行循环扩增形成大量L‑dsDNA。(3)将形成的带有巯基及生物素修饰的L‑dsDNA通过金‑硫键固定于BSA修饰的金电极上,通过滴加亲和素‑PolyHRP与L‑dsDNA上的生物素结合,最后将电极置于含TMB和H2O2的底液中,在HRP的催化下,H2O2能氧化TMB产生电化学信号。本方法具有经济、快速、高灵敏度及特异性等优点,可用于单碱基突变系列的检测,并且实现了对关节假体周围感染病人关节液中MRSA的检测。
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标签:化学分析
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