简介： 本发明涉及一种基于示踪分子的蛋白质-微球化学偶联效率的检测方法，包括如下步骤：(1)将蛋白质与外源性示踪分子按照一定质量比或者摩尔比混合；(2)在特定偶联反应条件下，将羧基化聚苯乙烯微球与蛋白质-外源性示踪分子溶液进行化学偶联；并通过改变偶联反应条件以及使用不同浓度的蛋白质-外源性示踪分子溶液，对化学偶联反应进行进一步的优化；(3)对羧基化聚苯乙烯微球表面的外源性示踪分子进行定量。本发明通过向氨基-羧基的偶联反应中加入少量的外源性示踪分子，并对其进行跟踪，可以有效地监测蛋白质与聚苯乙烯微球之间化学偶联的效率。该方法可以迅速、合理、有效地监测偶联反应。