简介： 本发明公开了一种检测5‑羟甲基胞嘧啶脱氧核糖核苷酸的光电化学生物传感器及其制备方法，所述光电化学生物传感器，包括：电极，依次修饰在电极表面的依次修饰在电极表面的硫化钨、聚多巴胺、巯基苯硼酸、5hmC、phos‑tag‑biotin和链霉亲和素。本发明利用硫化钨良好的光电活性和生物兼容性，聚多巴胺优良的电子供体性质和生物兼容性，phos‑tag‑biotin对磷酸基团的特异识别和结合性能，以及M.HhaI甲基转移酶催化的5hmC上羟甲基与巯基的特异反应，实现对5hmC的高灵敏性和高特异性检测。本发明方法可很好的消除5mC对5hmC检测的干扰。本发明的检测方法简单，实现了仪器小型化，且易于操作，仅对电极表面进行简单的处理，即可实现对5hmC的检测。