简介： 本发明公开了一种牛支原体抗体光激化学发光免疫检测试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括牛支原体P30蛋白单克隆抗体、山羊抗小鼠IgG偶联的受体微珠、带有His标签的牛支原体P30蛋白抗原和镍螯合的供体磁珠。本发明采用基因工程技术制备了牛支原体P30外膜蛋白，采用PEG1500细胞融合技术制备了牛支原体P30蛋白单克隆抗体，将纯化后的重组P30蛋白作为抗原和制备的单克隆抗体间的相互作用，通过样品中抗体与单克隆抗体竞争性结合重组P30蛋白，建立竞争性牛支原体抗体AlphaLISA的检测方法。该检测方法检测时间短，特异性好，灵敏度高，不需洗涤，操作简便，检测成本低。