简介： 本发明公开一种基于均相时间分辨荧光的检测重金属含量的方法，包括：将含有Eu3+离子的铕穴状化合物与300nM的1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺溶液和300nM的N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液搅拌混合形成第一活化混合液；将50nM木瓜蛋白酶与第一活化混合液偶联反应形成Eu3+盐修饰的木瓜蛋白酶；将荧光染料XL665与1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺溶液和的N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液搅拌混合形成第二活化混合液；将50nM木瓜蛋白酶与第二活化混合液偶联反应形成荧光染料XL665修饰的木瓜蛋白酶；将Eu3+盐修饰的木瓜蛋白酶与荧光染料XL665修饰的木瓜蛋白酶混合形成荧光检测液。本发明方法具有操作简单、速度快、灵敏度高、线性范围宽、使用成本低、能够实现现场检测等优点。