矿区环境样品微生物基因组DNA与总RNA同时提取的方法
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矿区环境样品微生物基因组DNA与总RNA同时提取的方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开了一种矿区环境样品微生物基因组DNA与总RNA同时提取的方法,步骤S1:环境样品的预处理,通过离心的方法收集液体样品中的微生物或通过过滤的方法剔除固体样品中的杂质;步骤S2:细胞的破碎,将步骤S1中预处理好的样品与石英砂混合后加入液氮研磨三次,再加入pH值为7.0的PIPES抽提缓冲液和十二烷基磺酸钠溶液在65℃下裂解细胞1小时;步骤S3:核酸纯化与沉淀,裂解细胞完毕后通过离心的方法收集上清液,并向上清液中加入萃取剂离心萃取蛋白与脂类,待萃取后,上清液用异丙醇沉淀并离心获取总核酸,总核酸经过分离即可得到宏基因组DNA与总RNA。本发明具有低成本、能够同时从矿区环境样品中提取高纯度、完整性好的宏基因组DNA与总RNA的优点。
本发明公开了一种矿区环境样品微生物基因组DNA与总RNA同时提取的方法,步骤S1:环境样品的预处理,通过离心的方法收集液体样品中的微生物或通过过滤的方法剔除固体样品中的杂质;步骤S2:细胞的破碎,将步骤S1中预处理好的样品与石英砂混合后加入液氮研磨三次,再加入pH值为7.0的PIPES抽提缓冲液和十二烷基磺酸钠溶液在65℃下裂解细胞1小时;步骤S3:核酸纯化与沉淀,裂解细胞完毕后通过离心的方法收集上清液,并向上清液中加入萃取剂离心萃取蛋白与脂类,待萃取后,上清液用异丙醇沉淀并离心获取总核酸,总核酸经过分离即可得到宏基因组DNA与总RNA。本发明具有低成本、能够同时从矿区环境样品中提取高纯度、完整性好的宏基因组DNA与总RNA的优点。
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标签:湿法冶金
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